近期,Plant Cell,Tissue and Organ Culture (PCTOC)在線發(fā)表了我所特色果藥選育推廣創(chuàng)新團隊題為“Developing an efficient protocol for hairy root transformation of Corydalis saxicola”的研究論文。我所潘燕林副研究員為該論文第一作者,郭倫發(fā)副研究員為論文通訊作者,團隊成員張怡彬、秦洪波和王新桂參與了研究工作。
巖黃連是罌粟科紫堇屬中一種珍稀的多年生草本植物,主要分布于我國西南巖溶地區(qū),是廣西傳統(tǒng)壯瑤藥資源。該植物富含多種生物堿,在肝炎和肝癌治療中發(fā)揮重要作用。目前,巖黃連的分子生物學研究剛起步,對其開展生物堿合成途徑、調(diào)控機制以及逆境脅迫響應機制等方面研究,篩選功能基因,將為其資源保護和開發(fā)利用奠定基礎(chǔ)。然而,其遺傳轉(zhuǎn)化體系的缺乏嚴重限制了后續(xù)的功能基因研究和種質(zhì)創(chuàng)新進程,不利于該物種的開發(fā)利用。
該研究對多種影響巖黃連遺傳轉(zhuǎn)化效率的因素進行了深入探索,評估其對發(fā)根誘導效率和外源報告基因的陽性比例的影響,從中篩選出合適的菌株、根誘導培養(yǎng)基、外植體類型以及適宜的侵染和共培養(yǎng)時間,最終建立起一種基于發(fā)根農(nóng)桿菌介導的巖黃連高效轉(zhuǎn)基因體系。
該遺傳轉(zhuǎn)化方法為巖黃連的分子生物學研究,特別是次生代謝物生物合成途徑研究奠定了良好基礎(chǔ)、提供了技術(shù)支持,有利于推進巖黃連基于CRISPR/Cas9系統(tǒng)的基因組編輯的發(fā)展。
發(fā)根農(nóng)桿菌介導巖黃連毛狀根轉(zhuǎn)化的表型分析及PCR驗證
發(fā)根農(nóng)桿菌介導的巖黃連遺傳轉(zhuǎn)化流程
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